電子顯微鏡和數(shù)碼顯微鏡的區(qū)別
電子顯微鏡和數(shù)碼顯微鏡的區(qū)別
“數(shù)碼顯微鏡"實(shí)際上是光學(xué)顯微鏡上加裝的數(shù)碼成像裝置,可以將顯微鏡形成的圖像直接顯示在電腦屏幕上?;A(chǔ)仍然是光學(xué)顯微鏡,而電子顯微鏡的成像原理是根本的區(qū)別。在這里,我們要區(qū)分分辨率和放大倍數(shù)。當(dāng)一個(gè)小物體被放大成像時(shí),它的高分辨率取決于反射光波的波長(zhǎng)。波長(zhǎng)越短,分辨率越高。電子顯微鏡使用波長(zhǎng)比普通可見光短得多的X射線成像,當(dāng)然分辨率很高,而普通“數(shù)碼顯微鏡"的放大倍數(shù)可以很大,但分辨率無法提高。
光學(xué)顯微鏡的分辨率與光波的波長(zhǎng)有關(guān)。對(duì)于接近和小于光波波長(zhǎng)的物體,光學(xué)顯微鏡是無能為力的。電子運(yùn)動(dòng)的波長(zhǎng)比光波的波長(zhǎng)短得多,可以看到更小的物體。光學(xué)顯微鏡由一組光學(xué)透鏡組成。放大成像系統(tǒng),電子顯微鏡用電子流代替可見光,磁場(chǎng)代替透鏡,電子運(yùn)動(dòng)代替光子,這樣你就可以看到比光學(xué)系統(tǒng)能看到的更小的物體。
電子顯微鏡以電子束為基礎(chǔ)。照明光源是利用電子流向樣品的透射或反射和電磁透鏡的多級(jí)放大在熒光屏上成像的大型儀器,而光學(xué)顯微鏡是利用可見光的光學(xué)儀器。光照亮微小的物體,形成放大的圖像。綜上所述,電子顯微鏡和光學(xué)顯微鏡主要有以下區(qū)別:
1、照明光源不同。電子顯微鏡使用的照明源是電子槍發(fā)出的電子流,而光鏡的照明源是可見光(日光或光),由于電子流的波長(zhǎng)短得多比光波的波長(zhǎng),所以電子顯微鏡的放大倍數(shù)和分辨率明顯高于光鏡。
2.鏡頭不同。在電子顯微鏡中起放大作用的物鏡是電磁透鏡(在中心可以產(chǎn)生磁場(chǎng)的環(huán)形電磁線圈),而光透鏡的物鏡是由玻璃制成的光學(xué)透鏡。電子顯微鏡中有三組電磁透鏡,相當(dāng)于光鏡中的聚光鏡、物鏡和目鏡的功能。
3、成像原理不同。在電子顯微鏡中,作用是將試樣上的電子束通過電磁透鏡放大,實(shí)現(xiàn)在熒光屏上成像或作用在感光膜上。電子密度差異的機(jī)理是當(dāng)電子束作用于試樣時(shí),入射電子與物質(zhì)的原子發(fā)生碰撞而發(fā)生散射。由于樣品的不同部分對(duì)電子的散射程度不同,因此樣品的電子圖像以陰影呈現(xiàn)。和光鏡中的樣品產(chǎn)品實(shí)物圖像呈現(xiàn)亮度差異,這是由于被測(cè)樣品的不同結(jié)構(gòu)吸光量不同造成的。
4. 使用不同的試樣制備方法。用于電子顯微鏡觀察的組織細(xì)胞標(biāo)本的制備程序復(fù)雜,技術(shù)難度大,成本高。材料提取、固定、脫水、包埋等環(huán)節(jié)需要特殊的試劑和操作。之后,需要放置嵌入的組織塊。進(jìn)入超薄切片機(jī),切成厚度為50~100nm的超薄標(biāo)本。光鏡觀察的標(biāo)本一般放在載玻片上,如普通組織切片標(biāo)本、細(xì)胞涂片標(biāo)本、組織壓片標(biāo)本和細(xì)胞滴標(biāo)本等。