高壓滅菌鍋的使用注意事項
高壓滅菌鍋的使用注意事項
高壓蒸汽滅菌原理
高壓蒸汽滅菌應(yīng)用廣泛,效率高,是微生物學(xué)實驗中zui常用的滅菌方法。這種殺菌方法是基于水的沸點隨著蒸汽壓力的增加而增加的原理而設(shè)計的。當蒸汽壓力達到1.05千克/cm2時,水蒸氣溫度上升到121 ℃。15 ~ 30分鐘后,可以殺死罐內(nèi)物品上的各種微生物及其孢子或孢子。一般培養(yǎng)基、玻璃器皿、傳染性標本和工作服都可以用這種方法進行消毒。
請注意高壓蒸汽滅菌的原理: 它是根據(jù)水的沸點隨著蒸汽壓力的增加而增加的原理設(shè)計的。
壓力: 100KPa,水蒸氣溫度: 115 ℃,時間: 20min,各種微生物及其孢子
壓力: 147KPa,水蒸氣溫度: 121 ℃,時間: 15-30min,各種微生物及其孢子或孢子
壓力: 156KPa,水蒸氣溫度: 180 ℃,時間: 4H,熱低 (熱原): 熱低,即細菌中的脂多糖
壓力: 156KPa,水蒸氣溫度: 250 ℃,時間: 45 ',熱低 (熱原): 熱低,即細菌中的脂多糖
壓力: 156KPa,水蒸氣溫度: 650 ℃,時間: 1 ',熱低 (熱原): 熱低,即細菌中的脂多糖
溫度越高,所需時間越短,熱穿透能力越強。一般認為115 ℃-121.3 ℃ 不破壞培養(yǎng)基的組成。
高壓蒸汽鍋滅菌詳情
高壓蒸汽滅菌是將要滅菌的物品放置在密封的加壓滅菌鍋中,并通過加熱產(chǎn)生蒸汽,將消毒鍋套件中的水煮沸。當蒸汽急速將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中排出時,關(guān)閉排氣閥并繼續(xù)加熱。此時,由于蒸汽不能溢出,消毒鍋內(nèi)的壓力增加,從而增加沸點,獲得高于100 ℃ 的溫度。它導(dǎo)致細菌蛋白的凝固和變性,以達到殺菌的目的。當使用高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌時,排除滅菌鍋中的冷空氣是極其重要的,因為空氣的膨脹壓力大于水蒸氣的膨脹壓力,所以當水蒸氣含有空氣時,在相同的壓力下,含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽。因此,飽和蒸汽的滅菌更加*!1.使用前應(yīng)在水位線處加入高壓消毒鍋水;
2.將培養(yǎng)基、蒸餾水或其他待消毒器具放入消毒鍋中,蓋上鍋蓋,并檢查排氣閥和安全閥的狀態(tài) (打開上下排氣閥并關(guān)閉安全閥,然后加熱以方便空氣排出,上部,下排氣閥同時處于打開狀態(tài)。當水蒸氣從上下閥溢出時,在這種狀態(tài)保持7或8分鐘后,即在空氣排出后,關(guān)閉上排氣閥并調(diào)節(jié)下排氣閥。安全閥保持關(guān)閉),
3.打開電源,檢查參數(shù)設(shè)置是否正確,然后按下 “工作" 按鈕開始滅菌鍋工作; 當溫度達到105 ℃ 時,自動發(fā)送冷空氣,底部排水龍頭將自動關(guān)閉,然后壓力開始上升;
4.當壓力上升到0.15MPa(121 ℃) 時,滅菌鍋會自動再次放氣,然后在記錄時,一般培養(yǎng)基消毒20分鐘,蒸餾水消毒30分鐘;
V.達到規(guī)定的滅菌時間后,關(guān)閉電源,打開放氣閥緩慢放氣; 當壓力指針降至0.00MPa時,只有當沒有除汽放氣閥時才能打開蓋子。
六.注意事項
1.蒸汽耗盡前不要打開壓力鍋;
2.如果消毒介質(zhì)沒有及時在鍋內(nèi)取出,蒸汽排出后應(yīng)打開蓋子,介質(zhì)不應(yīng)在鍋內(nèi)過夜。
3.當量規(guī)手高于0.05MPa時,蒸汽釋放得太快,以防止壓力快速下降以及液體從培養(yǎng)容器中沸騰和溢出。
4.在操作過程中,請注意安全并小心燃燒。
在標準大氣壓下,水的沸點為100攝氏度。壓力越高,相應(yīng)壓力下的沸點越高。這是高壓蒸鍋,它表明壓力必須大于標準大氣壓 (通常地球表面的大氣壓被認為是標準大氣壓),也就是說,高壓蒸鍋必須超過100攝氏度才能沸騰并產(chǎn)生蒸汽。在關(guān)閉安全閥之前,至少要等到水煮沸并排出蒸汽約一分鐘,這可以使高壓蒸鍋中的壓力迅速上升,事實證明,由于壓力的迅速上升,沸水停止沸騰。當壓力高、沸點高時,水蒸氣變成液態(tài)水,釋放出大量汽化潛熱,這是高溫高壓的目的,從而在相同溫度下達到殺菌原理的目的,濕熱的殺菌效果大于干熱。有三個原因:
首先,天氣又熱又潮濕細菌吸水,蛋白質(zhì)容易凝固。由于蛋白質(zhì)含水量的增加,所需的凝固溫度降低,
第二,濕熱的滲透大于干熱;
第三,濕熱蒸汽有潛熱。當每克水在100 ℃ 時,當它從氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時,可以釋放出2.26kJ (千焦耳) 的熱量。這種潛熱可以迅速提高滅菌對象的溫度,從而提高滅菌效率。
當使用高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌時,排除滅菌鍋中的冷空氣是極其重要的,因為空氣的膨脹壓力大于水蒸氣的膨脹壓力,所以當水蒸氣含有空氣時,在相同的壓力下,含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽。如果壓力沒有下降到0,打開排氣閥,鍋內(nèi)的壓力會突然下降,由于內(nèi)外壓力不平衡,導(dǎo)致容器中的培養(yǎng)基沖出燒瓶口或試管口,造成棉花覆蓋污染的培養(yǎng)基和污染。它需要超過100度,即相應(yīng)壓力下的沸點,才能使水劇烈沸騰并消除鍋中更多的空氣。
高溫滅菌操作中常見錯誤分析
高溫殺菌是指用熱能殺死微生物。原理是高溫使原生質(zhì)體內(nèi)的蛋白質(zhì)變性,使酶失活,導(dǎo)致微生物死亡。高溫滅菌主要包括高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌和燃燒滅菌。如果操作不當,則無法達到預(yù)期的殺菌效果。常見錯誤分析如下。
1高壓蒸汽滅菌
蒸汽滅菌屬于濕熱滅菌。由于濕熱滅菌的潛在存在,滅菌物體的溫度低于蒸汽。蒸汽在其表面凝結(jié)成水以釋放潛力,消毒物體的溫度可以迅速升高。并且由于水和蒸汽比空氣具有更大的熱容量、更快的熱傳導(dǎo)和更強的滲透,與干熱滅菌相比,滅菌需要更低的溫度和更短的時間。由于高壓蒸汽滅菌中的蒸汽溫度隨著壓力的增加而升高,因此用于滅菌的高溫蒸汽是通過壓力獲得的。
便攜式高壓滅菌鍋操作中常見的錯誤包括:
(1) 排氣不完整。在增強之前,應(yīng)將鍋內(nèi)的冷空氣排干。由于空氣是不良的導(dǎo)熱體,如果不排干,冷空氣將很好地聚集并停留在消毒罐中消毒缸的中下部,圍繞待消毒的物體。在這種情況下,如果鍋內(nèi)只排除一半的空氣,當量規(guī)手達到105帕?xí)r,鍋內(nèi)的實際溫度只能達到112 ℃,比要求的121 ℃ 低9 ℃。很多,會導(dǎo)致滅菌不*,可能會引起大面積的細菌。(自動高壓消毒鍋上下排氣閥必須打開并加熱以排出空氣)
(2) 排氣軟管未按要求插入滅菌缸的下部,或排氣軟管損壞或丟失。消毒鍋中的冷空氣通過排氣軟管排出。上述情況將導(dǎo)致滅菌缸外的蒸汽通過排氣閥直接排出鍋內(nèi),滅菌罐內(nèi)的空氣排放將被堵塞。
(3) 消毒缸內(nèi)的物品堆積過緊過滿,阻礙了蒸汽的循環(huán)和熱交換,減慢了容器內(nèi)的溫升,導(dǎo)致物體內(nèi)部滅菌不*。
(4) 加熱太快。滅菌時間是根據(jù)達到要求溫度后的持續(xù)時間來計算的,但溫度的上升和下降過程也起到滅菌的作用。如果溫度上升和下降太快,滅菌效果將受到影響總累積溫度的影響。此外,如果溫度上升太快,特別是當使用外源蒸汽時,滅菌物體內(nèi)部的溫度將落后于壓力表指示的溫度。
(5) 消毒對象的體積 (容量) 太大。在組織培養(yǎng)或常規(guī)微生物實驗中,高溫蒸汽滅菌通常在121 ℃ 下需要15分鐘 (即蒸汽壓力為1千克/cm2或15鎊/英寸2,或0.105MPa)。本規(guī)定僅適用于容量小于200毫升的試管和三角瓶。如果體積過大,特別是固體介質(zhì),會導(dǎo)致滅菌不*,滅菌時間應(yīng)適當延長。
(6) 滅菌時間的任何延長。規(guī)定的滅菌溫度和時間是通過科學(xué)實驗確定的,只要能按照正確的滅菌程序達到滅菌目的。然而,在實踐中,人們往往為了 “確保*滅菌" 而任意延長滅菌時間。這樣,在滅菌過程中溫度對培養(yǎng)基的損害影響被忽略,這是不值得損失的。
(7) 溫度不穩(wěn)定。滅菌過程中,溫度 (壓力) 升降,尤其是便攜式電能滅菌鍋。它沒有溫度控制裝置,很難控制溫度。操作員可以配置調(diào)壓變壓器,通過調(diào)節(jié)電壓來控制溫度。此外,還經(jīng)常存在消毒鍋內(nèi)加水太少 (應(yīng)添加2 ~ 3L); 容器內(nèi)溶液過多 (少于2/3) 等問題; 安全閥等故障。
2干熱滅菌
干熱滅菌是指在烘箱中160 ℃ 下保持2小時消除物體上的微生物的方法。常見錯誤包括:
(1) 將消毒物品 (如培養(yǎng)皿) 堆放,堆放得太滿太擁擠,妨礙空氣流通以及熱傳遞和交換;
(2) 加熱時不要打開盒子的頂部,影響盒子中冷空氣和水蒸氣的去除;
(3) 在高溫 (80 ℃ 以上) 下拆箱取物,熱蒸汽噴出導(dǎo)致燒傷和突然冷卻,導(dǎo)致玻璃器皿破裂;
(4) 溫度過高 (180 ℃ 以上) 導(dǎo)致包裝紙和棉布結(jié)焦,失去防菌或過濾功能;
(5) 將槍頭、離心管、試管蓋、過濾器等不耐熱的塑料制品放入烘箱中滅菌熔化。
3燃燒滅菌
也就是說,直接用火焰將微生物燒死。特點: 簡單、快速、*。它主要用于接種工具和器具的消毒。例如,接種杯、鑷子、剪刀、玻璃棒、瓶口和密封用鋁箔滅菌的常見錯誤如下:
(1) 接種工具的滅菌范圍不夠。如果長度不夠,則由于燃燒過程中沒有旋轉(zhuǎn),內(nèi)外兩側(cè)的滅菌不均勻;
(2) 接種工具用于接種而不降至常溫;
(3) 玻璃器皿過度燃燒,使棉布覆蓋、密封薄膜結(jié)焦或熔化
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